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单层冻干管的开启和菌种复苏方法

发布日期:2017-01-07

上海生物网20161216日报道

  单层冻干管的开启方法

1)滴水破开法

   首先用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,然后将冻干粉甩至底部圆球位置,将冻干管的尖端(注意不是圆球端)放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处,此时冻干管的尖端会自动破开。最后用镊子轻轻敲下冻干管尖端,并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)

 

2)首先用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的尖端(注意不是圆球端)放在火焰上加热。然后将冻干粉甩至底部圆球位置。直接用大镊子敲打尖端,敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。 然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)

 

菌种复苏方法

1)菌种活化前,如要长期保藏,可将冻干管放在-20度条件下保存。

2)此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能剩菌粉下次使用。

3)冻干管中大部分是用牛奶做保护剂,菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。

4)冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长出,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养出。

5)正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。

6)打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。

7)以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且昨晚后所有器皿都要经灭菌后再销毁。

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