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质粒使用和保藏方法

发布日期:2017-01-07

简要介绍

   本公司提供的质粒有三种类型:质粒、甘油菌和穿刺菌。客户可以根据自己的喜好自由选择其中一种。质粒形式:冰袋运输。长期保存条件-20度。储存时间长,可达到5年之久。需要转化感受态细胞扩增质粒。甘油菌形式:常温运输。长期保存条件-80度。-80度条件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提质粒。穿刺菌:常温运输,可用顺丰航空快递,到货时间快。保存条件为4-10度。保存时间6个月。可直接培育繁殖抽提质粒。

使用方法

质粒形式使用方法:

1)制备转化感受态细胞;(2)热击法转化感受态细胞;(3)挑取单克隆,培养单克隆并抽提质粒。

甘油菌使用方法:

1)配置LB培养基,LB液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L pH7.4 ,灭菌后,加入相应的抗生素;

2)接种100ul1-3ml的含抗生素的培养基中,37度,220rpm培养18小时以上;

3)使用质粒抽提试剂盒抽提质粒。

穿刺菌使用方法:

1)配置LB培养基,LB液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L pH7.4 ,灭菌后,加入相应的抗生素;

2)接种100ul1-3ml的含抗生素的培养基中,37度,220rpm培养18小时以上;

3)使用质粒抽提试剂盒抽提质粒。

菌种保藏方法:

注意要做好含质粒的菌种保藏工作,保存方法为甘油菌形式,-80度保藏。

 

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