引物产品使用方法

---

Oligo合成产品使用说明

尊敬的客户：

您好！

感谢您对我们的信任与支持！您在使用本公司的Oligo合成产品时请阅读以下说明。

（1） 我们提供的合成报告上的Oligo序列是该Oligo合成时，由合成仪控制电脑及时打印的，所合成的oligo序列与此序列完全一致，如果该序列与您提交给我们的序列不同，请您立即与我们联系。

（2） 我们所提供的Oligo是通过紫外分光光度计在260nm波长下来定量的，其摩尔消光系数是根据碱基组成和邻位效应计算所得。我们在合成报告单上提供了每条Oligo的分子量、OD数、以及每管OD的nmole和μg数等，其中DNA还提供Tm值、GC含量值等。在引物的标签上我们同时提供了每管引物的总nmole数。

此报告单上提供的Oligo分子量均按照精确算法进行计算，公布如下：

MWDNA=（#A×313.21）+（#G×329.21）+（#C×289.18）+（#T×304.20）+（#I×314.19）+（#U×290.17）+（Nmod×Wmod）-61.96

MWRNA=（#A×329.21）+（#G×345.21）+（#C×305.18）+（#U×306.20）+（Nmod×Wmod）-61.96

注：#代表对应碱基的个数；Nmod，Wmod分别为修饰基团的数目和分子量；兼并碱基的分子量为兼并碱基的分子量总和除以兼并数。

TM值计算公式：当长度≤20mer，Tm=4℃(G+C)+ 2℃(A+T);当长度>20mer,Tm=0.41(% of GC)-675/L+81.5

注：1、L:引物碱基数：% of GC ：引物GC含量；% of GC = GC个数/引物总碱基数

2、TM值计算并不保证正确，只是为实验参数设置提供一个参考。

（3） 我们提供的Oligo合成产品经真空干燥呈薄膜状或粉末状附在离心管壁上，使用前请先离心再小心开启，以免丢失。如您需要将引物稀释到10 uM,需要加入该管引物的（总nmole数*100） μL的无菌水或者pH8.0的TE溶液，然后轻轻盖上管盖，震荡混匀使其充分溶解。为了防止Oligo降解，溶解后请于-20℃保存，并避免反复冻融。尤其需要注意的是，RNA极易被RNase降解，因此必须确保在溶解以及相关实验操作时在无RNase的环境下进行。凡Oligo使用一段时间后出现讲解的，均可能与您的保存方式和实验用水的质量相关，此类情况我公司不承担相关责任。

（4）我们提供的Oligo的5’端和3’端均为羟基，可直接用于PCR。如果需要标记磷酸基团，请在提交订单时在本公司订购单的5’端和3’端修饰栏的下拉框内选择Phosphate。如需其他的荧光标记和碱基修饰服务，也请在此下拉框中选择。

（5）荧光标记的产品，如FAM、HEX、TAMRA等标记的Oligo因为光敏感，需避光保存。

（6）对于DNA引物我们提供PAGE和HPLC纯化方式。

（7）引物合成是一种多步骤的化学反应，每一步的合成效率不可能达到100%，副产品不可以避免。在您PCR扩增克隆以后，建议挑取2-3个克隆进行测序。如您发现所有克隆都在引物区存在突变，请及时与我们联系，我们会为您免费重新合成一次。